A1级小鼠MCAO栓线使用说明（仅供参考）

本产品是用刚柔适度的单丝尼龙线，经显微操作将其一端烧制成特定直径的光滑的球形。使用前请用放大镜确定球端位置（线栓球端一般在容器底部）。本产品仅供一次性使用，再次使用会增加失败的风险。正式实验前，请做预实验，确定与所使用的动物体重相匹配的栓线。

小鼠MCAO模型制备方法（仅供参考，建议做预实验）

1. 实验开始前，将栓线用75%酒精擦洗干净，在距球端9-10 mm处做标记（用防水的蓝色或黑色记号笔），作为插入深度的参考，置0.9% 的无菌生理盐水中备用。

2. 将小鼠用5%水合氯醛生理盐水溶液麻醉（350mg/kg, ip；浓度过高可导致致命的麻痹性肠梗阻），仰卧于温控手术台上（为避免麻醉大鼠眼睛长时间的干涩受伤，请在眼球涂适量抗生素眼膏）。常规消毒后颈正中切开皮肤，依次分离左侧颈总动脉(CCA)、颈外动脉(ECA)、颈内动脉(ICA)，烙断ECA的分支动脉，结扎ECA远端并烙断。

3. 用动脉夹夹闭CCA和ICA。

4. 在 ECA 剪一小口,将栓线球端插入ECA，并用手术线轻轻结扎。

5. 松开ICA的动脉夹, 将栓线顺势插入ICA ，插入栓线至大脑前动脉（ACA）起始部，至有阻力感为止，一般10mm左右（从CCA分叉起），阻断大脑中动脉（MCA）的血液供应。（切记缺血期间防止栓线脱位，造成缺血不完全，可以用小动脉夹夹闭ICA固定栓线，避免脱出）

6. 将ECA上的手术线适度扎紧。

7. MCA 阻断若干时间后，将栓线从颅内非常小心的拔出，直到栓线的球端退至ECA内（不要完全拔出，以免出血），剪断ECA外的栓线，缝合皮肤（建议伤口处涂抹少许长效局麻药，减轻术后疼痛）。建议麻醉大鼠后，再拔出栓线，可减少蛛网膜下腔出血的发生率。

＊关于温度控制：小鼠麻醉后，由于温度调节中枢受到抑制，20min后体温会快速下降至33度，60min后会将至30度，因此将麻醉动物肛温维持在36-37度，十分必要。此外，小鼠对环境温度很敏感，最适环境温度为21-26度，MCAO术后小鼠在37度环境下，将很快死亡，因此维持最适的环境温度同样十分重要。制备MCAO模型，如果不控制温度，模型不稳定且死亡率高，必须予以重视。

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