排水法测定脑梗死体积
时间：2016-12-12
采用我们建立的脑梗死体积排水测定法[20]，并进一步改进。在一带盖的平皿内，叠放三张浸泡过1.5%多聚甲醛磷酸缓冲液的滤纸。将大鼠脑片的左右半球沿正中分离，沿TTC染色界线用手术刀片仔细将左半球脑片梗死区部分剥离。将待测大鼠脑片置滤纸上，盖上平皿的盖，以保证每个脑片表面湿润程度的一致，即避免脑片表面有过多的液体或因液体蒸发使表面干燥。测右半球脑片的总体积和左半球脑片正常脑组织的总体积，二者之差即为脑梗死体积。具体过程简言如下(Fig.1-3)：⑴打开容量瓶C的盖子并注入4/5体积的脑组织固定液。调节三通F、启动微量泵，通过注水管D分别将测量管A、B（精度为1 mm3）装满固定液，液面以刚超过的球状膨大处为好，不要进入和测量管上端相连的硅胶管内。在容量瓶内补加液体达4/5体积，盖严瓶盖，反向启动微量泵，分别将测量管内液体排入容量瓶。容量瓶注满液体后，多余的液体从排水管E排出。最终使测量管A、B的液面处于0刻度或稍高位置，分别为X1、Y1，E管的液面达某一刻度。⑵调节三通阀门F使A和D断开、B和D相通，启动微量泵使C内的液体进到B内。打开瓶盖，放入待测脑片，然后盖严瓶盖，此过程不要丢失任何液体。反向启动微量泵，使B内液体缓慢进入C，待C内液体注满，且E管液面达调定刻度，停止微量泵。此时，若B管的液面刻度为Y2,则Y2-Y1即为被测脑组织的体积。如B管的液面超过最高刻度，则调节F使A和B相通，将B管液体排入A,直到B管的液面降至最高刻度以下。此时，若B管的液面刻度为Y2，A管的液面刻度为X2,则(Y2-Y1)+(X2-X1) 即为被测脑组织的体积
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