心脏灌注固定吊瓶

1    用于大鼠的全身组织固定。

2    组成：两个600ml的灌注瓶、一套连接好的长度150厘米的Y型输液器（前端通过2个较粗的硅胶管和灌注瓶相连，尾端连接1个16号针头）、一根备用延长管。

3    使用方法：将输液器的两个硅胶管端分别连接到两个灌注瓶（预先标记好“固定液”和“生理盐水”），通过自带的2个流速调节器锁紧管路，分别在两个瓶中加入足量的生理盐水或固定液，缓慢松开固定液管路的流速调节器，将管路充满固定液（滴壶中保持一半液体），锁紧固定液管路，按相同方法松开生理盐水管路，使充满生理盐水后锁紧。

4    大鼠麻醉后，背位固定于手术台上，开胸、充分暴露心脏。

5   经左心室穿刺，将充满生理盐水的16号针头插至主动脉起始部，在右心耳剪一切口（不要太小，尽可能大为好）。

6   经主动脉全速灌注约200 ml37℃生理盐水（输液瓶距离心脏120 cm高），待右心耳的流出液澄清，且肝脏无血色后，锁紧生理盐水管路并立即以全速开通固定液管路，用新配制的4%的多聚甲醛磷缓液（pH 7.4, 0.1 mol/L，72小时内配制）替换生理盐水，全速灌注，待大鼠出现强烈的全身收缩反应后，减慢灌注速度（滴连滴），再灌注40 min。

7   取全脑或其它组织，在相同的固定液中，4℃再固定24h。